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    鱼脂多糖(LPS)ELISA试剂盒 操作步骤

    点击次数:803  更新时间:2019-06-12

    操作步骤

    1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
    3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
    8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
    9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

     


    鱼脂多糖(LPS)ELISA试剂盒性能
    1. 灵敏度:小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
    2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
    3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

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