特点：
1、灵敏度高，抗污染能力强，定量准确，重复性好；
2、样本处理与PCR扩增在同一个PCR反应管中即可完成；
3、无需加热，无需离心，操作极其简单，耗材消耗极少，只需微量标本即可实现高灵敏度检测；
4、设置了内对照（内标），设置了UNG酶+dUTP防污染体系，避免假阴性、假阳性结果的发生；
5、设置了内参比荧光ROX，校正加样误差和管间差异，使定量更准确。
操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
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