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    植物ELISA试剂盒的基本原理和实验操作步骤

    点击次数:822  更新时间:2020-07-15
       植物ELISA试剂盒的基本原理是:
      ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
      ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
     
      植物ELISA试剂盒的实验操作步骤如下:
      1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可在小试管中进行稀释。
     
      2、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
     
      3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
     
      4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
     
      5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
     
      6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
     
      7、温育:操作同3。
     
      8、洗涤:操作同5。
     
      9、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
     
      10、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
     
      11.、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值),测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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