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    NOD样受体1elisa试剂盒的性能和操作流程

    点击次数:968  更新时间:2021-02-18
       NOD样受体1elisa试剂盒的性能:
      准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值。
      灵敏度:检测浓度小于0.1pg/mL。
      特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
      重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
      贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
     
      NOD样受体1elisa试剂盒的操作流程如下:
      (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设803个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
     
      (2)酶标板置4℃,包被过夜。
     
      (3)洗板:吸干孔内反应液,产品仅用于科研用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
     
      (4)阴性对照孔每孔加入PBS50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
     
      (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
     
      (6)洗板。
     
      (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
     
      (8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
     
      (9)洗板。
     
      (10)每孔加TMB显色液100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
     
      (11)每孔加100μl2mol/LH2SO4终止反应。
     
      (12)分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,测得的OD值为两者之差,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
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