NOD样受体1elisa试剂盒的性能:
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值。
灵敏度:检测浓度小于0.1pg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
NOD样受体1elisa试剂盒的操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设803个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,产品仅用于科研用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板。
(10)每孔加TMB显色液100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl2mol/LH2SO4终止反应。
(12)分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,测得的OD值为两者之差,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。