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反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免04个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

蛋白激酶A2抗体

血管紧张素Ⅱ受体2抗体

ASH1蛋白抗体

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白2抗体

血管内皮细胞迁移蛋白抗体

醛糖还原酶相关蛋白质抗体

胆汁酸结合蛋白DDH2抗体

血管生成素样蛋白3抗体

甘油酯激酶线粒体抗体

磷酸化内收蛋白a1抗体

自噬体ATG16L2蛋白抗体

睾丸酸性磷酸酶抗体

酸性磷酸酶抗体

极光激酶A相互作用蛋白1抗体

载脂蛋白样蛋白6抗体

凋亡相关蛋白TGFb信号抗体

A2LD1蛋白抗体

α1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶α4Gn-T抗体

芳香乙酰胺脱乙酰基酶抗体

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白4抗体

氨基乙二酸半醛脱氢酶磷酸泛酰巯基乙胺转移酶抗体

赖氨酸酮戊二酸还原酶抗体

锚蛋白重复域6抗体

精氨酸酶2抗体

醛固酮还原酶家族1成员C3抗体

促肾上腺皮质激素受体

褐黑素相关蛋白ART抗体

肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白抗体