技术文章/ARTICLES

洗涤方法：

1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。

实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。

5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。

7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体

心钠素抗体

丙氨酰tRNA合成酶2抗体

丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体

核突触蛋白α抗体

自噬相关蛋白4B抗体

整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体

α-辅肌动蛋白4抗体

碱性磷酸酶抗体

AU1 tag标签抗体

脂肪细胞增强结合蛋白1

蛋白激酶B

蛋白激酶B

血管生成素样蛋白2抗体

血管生成素3/血管生成素4抗体

膜粘连蛋白 I抗体

膜粘连蛋白 Ⅱ抗体

活化转录因子1抗体

水通道蛋白4抗体

活化复制因子2抗体

腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体

糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体

血管紧张素Ⅱ抗体

血管紧张素Ⅱ受体1抗体

血管生成素-1抗体

膜粘连蛋白5抗体

重组膜粘连蛋白5抗体

衔接蛋白α-Adaptin抗体

凋亡蛋白活性因子-1抗体

凋亡蛋白活性因子-1抗体

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体

载脂蛋白E抗体