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    PCR检测试剂盒的特点及其依据的检测步骤

    点击次数:1326  更新时间:2021-11-26
       PCR检测试剂盒利用离心柱内硅基质膜提取猪伪狂犬病毒DNA,以此为模板,在特异引物和TaqDNA聚合酶的作用下,经高温变性,低温退火、中温延伸的循环,使特异的DNA的片段拷贝数放大一倍。经过30次循环,使扩增的DNA的片段放大数百万倍。将扩增的DNA的片段进行电泳,经染色后在紫外灯照射下,肉眼可见DNA的片段的扩增带,进而判断待检样本中是否含有猪伪狂犬病毒。
     
      PCR检测试剂盒具有下列特点:
      1.根据DHBV的保守序列设计的引物,与相关病毒无交叉反应。
     
      2.灵敏度比常规PCR高2-300个数量级,可以达到几百拷贝/反应。
     
      3.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
     
      4.一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
     
      5.足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
     
      PCR检测试剂盒的检测步骤:
      1.核酸提取
      样品进行适当处理后,可采用核酸提取试剂盒,该试剂盒可用于对样本中病毒RNA的提取,请按照说明书进行操作。也可选择其他合适的商品化产品。
     
      2.扩增试剂的准备
      将各试剂按照用量加入无菌离心管中,充分混匀,短暂离心后在PCR反应管中分别加入18μL混合液。
     
      3.加样
      将制备好的样本,阴性对照,阳性对照各取2μL分别加入对应反应管中,加完后盖紧PCR反应管盖,置于PCR仪上。
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