方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
中分子量单一蛋白Marker(66 kD)
中分子量单一蛋白Marker(45 kD)
中分子量单一蛋白Marker(35 kD)
中分子量单一蛋白Marker(27 kD)
植物蛋白提取试剂(带酶抑制剂)
真核细胞膜蛋白抽提试剂(带酶抑制剂)
一步法Western专用封闭液
羊IgG
小鼠汉坦病毒抗体(HV-Ab)ELISA 试剂盒
显影粉
微量BCA蛋白定量试剂盒
兔IgG-兔IgG
鼠IgG-鼠IgG
蓝色预染中分子量蛋白Marker
蓝色预染高分子量蛋白Marker
可视型中分子量蛋白Marker
可视型蓝色预染中分子量蛋白Marker
考马斯亮蓝R-250
考马斯亮蓝G-250
广谱彩虹预染蛋白Marker
甘氨酸
定影粉
蛋白银染试剂盒
蛋白标准溶液-BSA
彩虹预染中分子量蛋白Marker
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