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    ​小鼠载脂蛋白E(Apo-E)酶联免疫分析试剂盒操作步骤

    点击次数:557  更新时间:2022-11-22

    操作步骤:

    1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7. 温育:操作同3。

    8. 洗涤:操作同5。

    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

    二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体ART4 0.2ml

    AKIRIN2蛋白抗体AKIRIN2 0.2ml

    ADP核糖基化样因子8B抗体ARL8B 0.2ml

    三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体ATAD2 0.2ml

    AKIRIN1蛋白抗体AKIRIN1 0.1ml

    锚定蛋白样蛋白1抗体ASZ1 0.2ml

    腺苷酸激酶2抗体Adenylate kinase 2 0.2ml

    精子顶体前体蛋白抗体Acrosin 0.2ml

    黑色素瘤缺失样蛋白1抗体AIM1L 0.2ml

    未知糖基化转移酶AER61抗体AER61 0.2ml

    铁蛋白Fe65抗体FE65 0.1ml

    抑癌基因ras同源家族1抗体ARHI 0.2ml

    转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体AP2 alpha 0.1ml

    心钠素抗体ANP 0.1ml

    丙氨酰tRNA合成酶2抗体AARS2 0.2ml

    丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体AKAP12 0.1ml

    核突触蛋白α抗体Alpha-Synuclein 0.1ml

    自噬相关蛋白4B抗体APG4B 0.2ml

    整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体ADAMTS12 0.2ml

    α-辅肌动蛋白4(内参)抗体alpha Actinin 4-Loading Control 0.1ml


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