操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
ABI2肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体
ARL11ADP核糖基化因子样11抗体
ARMCX3ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体
ARMCX1ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体
ARMCX2ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体
Apg10自噬相关蛋白10抗体
ACBD6酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体
Aminoacylase 1氨基酰化酶1抗体
Adipose Triglyceride Lipase脂肪甘油三酯脂酶抗体
phospho-AMPK alpha-1 (Thr172)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
Amphiregulin双调蛋白(结肠直肠细胞源性生长因子)抗体
phospho-AQP2(Ser264)磷酸化水通道蛋白2抗体
AXL粘附相关激酶抗体
phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703)磷酸化粘附相关激酶抗体
phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305)磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-AQP2(Ser269)磷酸化水通道蛋白2抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-AKT1(Ser129)磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198)磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ATF4 (Ser245)磷酸化活化转录因子4抗体
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