技术文章/ARTICLES

1、仪器质控
 为使仪器保持*工作状态，应建立维护和校正仪器的标准操作程序（SOP），所要控制的仪器包括移液器（加样枪）、温箱、洗板机和酶标仪。
◎移液器： 加样量小（20-200μl），其准确性直接影响实验结果，利用称重法检查：低、中、高三个刻度分别吸取指示量的水，万分之一天平称重后计算吸量是否准确，一般应在±5%以内；
◎恒温箱： 经常检查恒温箱温度计所示的温度和水中（或温箱内）实测温度是否一致，允许有±1℃的误差；
◎洗板机： 每个设置洗板后的残留液有各自的规定，一般不超过2μl；人工扣板时，垫纸不湿；定期检查管孔是否堵塞；
◎酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，定期检测校正，使其保持良好的工作性能。

2、试剂盒选择
◎应尽量选择正规，产品经相应政府部门审核认可，试剂应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
◎灵敏度：有二层含义，1）为试剂检出被检物质的zui低量的能力；2）为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
   ◎特异性：常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升   高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
   ◎精密度：一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。
   ◎准确度：通过添加回收实验进行评价。
   ◎简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性实验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。
   ◎安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
   ◎经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模或技术进步降低成本，而市场价格比较合理。
   ◎试剂评价：需要有的确证方法和确证的样品进行检测。

3、样本前处理注意事项
3.1 均质
组织样本:肉、肝食品类切细，用绞肉机反复绞碎，混合均匀。
水产样本：去除样品的非食用部分，食用部分切细，用均质器均浆；原料表面较脏时,需适当用蒸馏水清洗。
蛋类：鲜蛋去壳，蛋黄和蛋白充分混匀。
水果、蔬菜类：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。
3.2 振荡提取
 将提取溶剂加入到装有样品的具塞容器中，振荡，使提取溶剂与容器内的样品充分接触以深入到样本组织内部，提取待测组分。
3.2.1振荡方式：振荡器上进行上下、往返式振荡、手摇式上下振荡。
3.2.2 在组织样本中加入有机溶剂之间提取时，应边加边振荡，防止组织凝结成团，不利于提取。
3.3. 在用有机溶剂提取过程中，如果出现乳化现象，解决的方法有：①用细头轻轻的搅拌，破坏乳化后，再重复离心。②再加入适量的提取剂，重新振荡。注意离心后要保证样本的稀释倍数不变。
3.4 浓缩
    由于净化过程中引入的溶剂，可能会降低待测组分的浓度或者不适宜直接分析，需要去除全部有机溶剂。即试剂盒前处理步骤中把样本在60℃氮气下吹干，再用复溶液溶解干燥残留物。
浓缩方式：
    氮气吹干除杂、压缩空气吹干除杂。
注意：
3.4.1在吹干样本之前，用甲醇清洗针头，防止杂质干扰。
3.4.2在吹样本时，针头应在液面上空，避免与样本接触，防止产生交叉污染。
3.4.3样本吹干后应立即取下，避免吹的时间过长，影响zui终检测结果。
3.4.4不同的药物，吹干后样本的保质期不同，提倡待样本回到室温后立即复溶。