透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜 的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度, 通常是 4℃透析,升高温度可加快透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的zui多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的 是美国 Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司的各种尺寸的透析管, 截留分子量 MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的zui小分子量,缩写为 MwCO)通常为 1 万左右。 商品透析袋制成管状,其扁平宽度为 23 mm~50 mm 不等。为防干裂,出厂时都用 10% 的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质 和其它生物活性物质有害,用前必须除去。可先用 50%乙醇煮沸 1 小时,再依次用 50%乙 醇、0.01 mol/L 碳酸氢钠和 0.001 mol/L EDTA 溶液洗涤,zui后用蒸馏水冲洗即可使用。实 验证明, 50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
使用后的透析袋洗净后可存于 4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量 NaN2,以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易裂 口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。 新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使 用。 使用时, 一端用橡皮筋或线绳扎紧, 也可以使用特制的透析袋夹夹紧, 由另一端灌满水, 用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析 过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的 蛋白质溶液透析夜时,体积增加 50%是正常的。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析, 可在袋内放一截 两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管, 以使透析袋沉入液 面以下。 检查透析效果的方法是: 1% BaCl2 检查(NH4)2SO4, 1% AgNO3 检查 NaCl、 用 用 KCl 等。 为了提高透析效率,还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易 的透析装置。美国生物医学公司(Biomed Instruments Inc.)的各种型号的 Zeineh 透析 器,由于使用对流透析的原理,使透析速度和效率大大提高.
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