方法
1.准备感兴趣的目标。
2.表面染色后的细胞表面抗原。表面标记的选择取决于实验问题。在不同类型的细胞的表型标记,建3.议请查看相应的bestphenotyping标记图:小鼠或人。
4.zui后一次洗涤后,加入固定液100μ虽然涡流管和潜伏在黑暗中在室温下20分钟修复细胞。
5.添加1毫升每管通透性缓冲液,离心5分钟,吸出上清液。
6.重复步骤4。
7.悬浮细胞的通透性的缓冲区100μL和潜伏在黑暗中在室温下5分钟。
8.用20μl通透性缓冲抗因子的单克隆抗体荧光标记的*浓度和添加适当的管。混匀。此应用程9.序的抗体好的范围0.5-0.06μ克/ 106细胞。eBioscience荧光标记的抗细胞因子抗体也可在20μL /测试规格。如果使用这些试剂,加入20μL预滴定抗体相应的管。
10.潜伏在黑暗中在室温下20分钟。
11.增加通透性缓冲液1 mL,离心5分钟,吸出上清液。
12.悬浮细胞颗粒流染色缓冲液0.5毫升。
13.使用流式仪分析。
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