多数细胞系和原代都会以一种单层的形式生长（单层细胞）或者覆盖在玻璃或经处理的塑料物体表面。为了保持细胞的健康与活跃增殖，通常需要对细胞进行有规律的传代。
zui常见的传代方法是使用蛋白酶如胰酶或胶原酶破坏细胞间以及细胞与培养介质间的连接。当细胞被解离成单细胞悬液时，再将它们稀释并分发至新的培养容器中。在那里，细胞可以重新贴壁生长和分裂，然后经过一段时间培养，细胞又再一次长满（接近汇合）。此时，细胞又需要进行传代或用于下游实验。
注意：以下指南描述了典型单层细胞的常规传代与维持的基本原则。为了得到一致的结果，坚持良好的培养记录非常重要，记录应包括细胞传代的日期和传代的次数。
细胞的检查：应该养成良好的习惯对进行常规的和认真的检查，以了解它们的状态和健康情况。
首先，用肉眼检查培养容器中是否存在可见的微生物污染，比如培养基pH改变、浑浊或有颗粒样的物体。同时也要注意观察有没有小的真菌菌落，因为它们在显微镜下不易被发现。这些菌落可能会飘浮在液体表面，特别是在培养容器周边附近。
其次，在倒置显微镜下观察细胞常规形态和生长状态，留意检查任何镜下可见的微生物污染的迹象。在某些细胞系中，培养液中漂浮的细胞通常是死亡的细胞。但是，许多细胞在进行有丝分裂的时候也会变圆，形成折光性很强（很亮）的球体，并且在受到扰动后也会飘浮起来。两者的区别在于，死细胞通常会变圆脱落但一般折光性不会很强。
除了这些日常检查外，还需要对细胞进行周期性的真菌、细菌以及支原体检查。
培养液的准备：准备针对特定细胞系在购买或文献中推荐使用的新鲜培养液，并用记号笔在培养容器上标记传代时间和代数等信息。确保添加了补充成分（如：谷氨酰胺、生长因子、抗生素等）并且预先放置培养箱进行了pH平衡。一个75cm2的培养瓶大约需要12-15ml培养液，如何使用其他规格的培养容器需要进行相应的调整。
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