在测定时，受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。抛开品牌、价格来说。
选择ELISA试剂盒首要考虑这几个条件：
1、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2、加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l，然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不 触及孔壁，小鼠轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4、配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
测定标准浓度的抗原ELISA试剂盒反应的光密度绘制标准曲线。测得待测样品反应的光密度，从而查得抗原量。在标记抗原竞争法中，定酶标记抗原的酶活性为100%，在加入作为标准样品的未标记抗原后，以酶活性降低的百分率绘制曲线，从曲线上查得待测抗原的量。至于对抗体的定量，则要绘制出竞争抵制曲线。在制作标准曲线时，需进行空白对照测定，进行校正。或者在测定时，将对照液作为零点测定点。
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