本实验要加入PSV2-neo、DNA与外源DNA共转染受体，这样可使受体细胞获得新霉素(neo)基因的抗药性，这样即使癌基因没有出现明显的“转化灶”，也可测出转入的外源性基因的抗neo的标记。而且还可利用被neo基因导入的受体细胞通过G418选择培养筛选转化的细胞建立细胞株。若以获取 “转化灶”为目的，可不加入PSV2-neo DNA只需将从癌细胞中提取的基因组DNA导入受体细胞即可，其方法如下：
1.基因组DNA转染：
(1)配制磷酸转染液
NaCl 8.0g
Hepes 5.0g 用时现配，pH很重要一定要控制在6.95±0.65
Na2HPO4 0.099g 消毒灭菌 -20℃贮存备用
加温水至 1000mL
(2)按前面介绍的方法提取癌基因组DNA。
(3)取供体基因组DNA50～100μg,加3M NaCl或醋酸钠，使zui终浓度至0.3M混匀。
(4)再加2倍体积无水乙醇3000r/min离心10分钟，去上清。
(5)加入转染缓冲液，待DNA充分溶解后，再加入2.5MCaCl2,含zui终浓度为125mM，用吸管轻轻吹打三次(不用搅拌器以防DNA袢结)，置室温下10～30分钟，待液体透明度降低，出现微浊兰色时，即可用于转染细胞。
(6)取生长状态良好处于半汇合阶段的对数生长期细胞，在转染前4小时，更换培养液(5ml/瓶)1次。
(7)转染：向每瓶中加DNA-磷酸钙沉淀物0.5～1mL/瓶，置37℃作用4～6小时。
(8)培养：弃去培养液，用15%甘油处理3分钟，无血清培养漂洗1次，接近汇合时血清用量降至5%，培养2～3周。
(9)检测：逐日观察，待出现“转化灶”后，克隆分离，扩大培养建立转化株。
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