产气肠杆菌PCR试剂盒是简便的利用CTAB取大肠杆菌基因组DNA的试剂盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再经加热使蛋白变性与DNA分离,乙醇沉淀核酸获得基因组DNA,可进行酶切、PCR等下游实验。该试剂盒仅用于科研领域,不用于临床诊断或治疗。
产气肠杆菌PCR试剂盒的操作说明:
1、本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用*融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以*融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2、为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
冷冻管开封:
用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌株复溶:
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入到冷冻管中。轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮:
用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。做好标识,在适宜温度下培养。细菌在30-‐35℃培养箱中培养24-‐48h,真菌在23-‐28℃培养箱中培养24-‐72h(必要时,可适当延长培养时间)。
菌株传代:
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。