维生素CELISA试剂盒的准备:
1.使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温,试剂不能直接在37oC溶解。
2.标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解。准备310个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成不同的梯度,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3.浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
维生素CELISA试剂盒的样本收集及储存:
1.细胞培养上清:
将细胞培养基移至无菌离心管,在4℃条件下1000×g离心10min,然后将上清等量分装于小EP管并于-20℃下保存,避免反复冻融。
2.血清样本:
室温血液自然凝固20min后,在4℃条件下1000×g离心10min,然后将上清等量分装于小EP管并于-20℃下保存,保存过程中如有沉淀,请再次离心,避免反复冻融。
3.血浆样本:
将全血收集到含抗血凝剂的管中,根据标本的实际要求选择EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合20min,在4℃条件下1000×g离心10min,然后将上清等量分装于小EP管并于-20℃下保存,避免反复冻融。