黄曲霉PCR试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素B1抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素抗体，同时黄曲霉毒素抗体与酶标二抗相结合，经底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。
黄曲霉PCR试剂盒的检测原理：
它是一种固相直接竞争酶联分析测定方法。聚苯乙烯微孔板中包被抗黄曲霉毒素的高亲和力抗体，这种抗体和黄曲霉毒素的四种亚型都能发生交叉反应。
利用甲醇提取样品中的黄曲霉毒素，把提取的样品和HRP标记的黄曲霉毒素混匀并加入对应的孔检测。酶标记毒素与标准品或者样品中黄曲霉毒素竞争与包被在微孔底部的抗体结合。
孵育一段时间后，倒出孔里的液体，清洗后加入显色底物，在酶的作用下孔里将会出现蓝色。显色颜色的深浅与结合物的量成正比例的关系，与标准品或样品中AFM的量成反比例关系。所以，标准品或样品中的AFM浓度越高，显色的蓝色将会越浅。加入酸，终止反应，底物颜色由蓝色变为棕黄色。
黄曲霉PCR试剂盒的检测程序：（注意标准及样品做平行试验，可以提高检测的准度及度）
1．开始实验前要求试剂及样品萃取液达到室温。
2．取适量的孔条固定在微孔板架上，未使用的孔条，与干燥剂一同放入密封袋中保存。
3．入酶标记物到微孔中。
4．入标准品及样品到相应的孔中，注意使用吸头防止交叉污染
5．入抗体溶液到微孔中，轻微震荡微孔板。
6．室温下孵育10分钟。
7．倒掉微孔中溶液，微孔中注满蒸馏水，然后到掉，重复4次，共五次洗板。
8．后一次清洗完后，倒掉孔中溶液，然后翻转微孔板在吸水纸上拍干。
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