感觉态细胞的制备：
注①：有化转和电转两种。
注②：制备具体步骤因人而异。
将处于对数生长期的大肠杆菌（细胞的感受态一般出现在对数生长期，新鲜幼嫩的细胞是制备感觉态细胞和进行成功转化的关键。对数生长前期的细菌可通过测定培养液的OD600控制，所以要严密监测细菌的OD值）置于经低温预处理的低渗CaCl2溶液（CaCl2和水需是较高纯度的）中，在低渗CaCl2溶液中，细胞会膨胀，同时Ca2+还会使磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，细胞膜通透性发生变化，极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基－磷酸钙复合物。（整个操作过程均应在无菌条件下进行，所用器皿高压灭菌处理）添加其它的二价金属离子、DMSO或还原剂等物质处理，提高转化率。
感觉态细胞的转化注意事项：
连接反应产物在转化之前在70ºC热灭活15min，连接产物在热灭活后无需纯化可直接使用；
DNA样本必须是溶解于ddH2O或TEbuffer的纯化样本。电转化样本中如果存在盐离子会导致电转过程中的高压电弧，从而引起细胞和DNA的损失；
微量离心管和电转杯在使用前必须冰浴；
在使用之前必须在冰上解冻；
为了得到高效的转化效率，请使用试剂盒中的重悬电转后的细胞，如果使用TB或其它培养基会降低感受态的转化效率；
电转后的细胞可以在LB或其它常规培养基上涂板。
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