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    菌种的保存方法

    点击次数:683次  更新时间:2016-11-21

    的保存方法

    低温保存法

    ①简单保存法,

    将琼脂斜面孢子培养物、

    菌丝悬浮液以及由麸皮、

    大米、小米等谷物原

    料制成的孢子培养物置于

    4

    ℃冰箱保存,

    保存时间不超过12个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达34个月;

    ②液氮超低温

    保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然

    后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35℃时,即可置于-150-196℃的液氮罐中保

    存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干

    燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

    脱水保存法

    ①沙土保存法,

    能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌23次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌馏水22.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,4℃冰箱保存保存期可达57年。

    冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管内于-20-30℃的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达510年之久。

    石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm4℃冰箱或低温干燥处保存,

    此法不适

    用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。

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