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    分析影响ELISA非特异性显色

    点击次数:647次  更新时间:2016-11-25

    分析影响非特异性显色

    目前因为技术前提的限制,包被用抗原或抗体的纯度不可能达到100%,所以有些非特异性显色不可避免,只能尽可能进步纯度,进步特异性。它具有良好的吸附机能,孔底透明度高,空缺值低,各板之间、统一板各孔之间机能相近。但同其它免疫诊断方法一样酶免试剂在它的研究、出产及使用中经常会遇到非特异性题目,本文就在实验过程中产生的一些原因及如何采取一些措施,消除非特异性显色作一分析。本文就这一原因作一扼要分析,以便可以通过以上措施把非特异显色降至zui低限度,从而进步检测的特异性,并得到更正确、可靠的实验结果。

     聚苯乙烯板因为原料的不同和制作工艺的差别,各产品的质量差异很大。溶血标本,红细胞溶解破裂,开释出血红素形成,而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。因此,在选择ELISA试剂盒同时要对其使用的微孔板型号进行认证,评估。试剂盒特异性因素固相载体的选择,ELISA中常用的固相载体有微量滴定板、小珠和小试管三种,以微量滴定板zui为常见。外源性干扰物,经常因样品采集、贮存、处理不当造成如样品溶血,被细菌污染,标本凝集不全等。如在冰箱中保留过久,其中的IgG可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。但因为受方法学及技术前提的限制,在酶联吸附测定中有时不可避免的会泛起一定的非特异性,但我们可以通过以上措施把非特异性显色降至zui低限底,从而进步检测的特异性,并得到更正确、可靠的实验结果。酶联免疫吸附试验(ELISA)自1971年自问世以来,以其敏感性高,特异性强,操纵简便、安全,而广泛应用于临床诊断,开创了免疫学诊断。

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