产品名称：乙醇含量生化检测试剂盒

规格：100管/96样 50管/48样 

货号 : EY-01S110

测试方法:微量法　可见分光光度法　　

分类：辅酶Ⅰ系列

测定意义：

 酒是含酒精（乙醇）饮料的统称，乙醇是酒的主要成分，是衡量酒质量的重要指标之一。我国是早发明酿酒的国家，也是酒类产品消费大国，其消费量居世界。因此，快速、准确测定酒中乙醇含量，对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。

测定原理：

乙醇在乙醇脱氢酶的催化下氧化脱氢生成乙醛，同时，NAD被还原生成NADH，NADH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色，通过450 nm下测定吸光值变化可测得乙醇含量。

需自备的仪器和用品：

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、蒸馏水。

试剂一：液体×1瓶，室温保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃保存。              

试剂三：粉剂×2瓶，－20℃保存。临用前加入22mL试剂二，现配现用。

试剂四：液体×1支，4℃保存。

1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌：按照细胞数量（57个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；16000g， 4℃离心20min，取上清液置冰上待测。

3、血清等液体：直接测定。

（1）按照蛋白浓度计算

活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1845个酶活单位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T

=1608×△÷Cpr

（2）按照样本质量计算

活性单位定义：25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为1845个酶活单位。

ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T

=1608×△A÷W

（3）按细胞数量计算

活性单位定义：25℃中每57个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为1845个酶活单位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=1608×△A ÷细胞数量

（4）按液体体积计算

活性单位定义：25℃中每毫升血清每分钟氧化1nmol NADH 为1845个酶活单位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V样÷T

=1608×△A

ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1 cm；V反总：反应体系总体积，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1 mL；T：反应时间，1min。