购买感觉态细胞客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研

培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

存

250mLAnticoagulant EDTA Solution（抗凝剂EDTA）Anticoagulant EDTA Solution常温保存

250mLAntigen Retrieval Reagent，5XAntigen Retrieval Reagent，5X常温保存

10gATP Solution（ATP溶液），100mMATP Solution，100mM常温保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH6.0 BES Buffer,0.5M,pH6.0 常温保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH6.5 BES Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH7.0  BES Buffer,0.5M,pH7.0  常温保存

100mLBES Buffer,0.5M,pH7.4  BES Buffer,0.5M,pH7.4  常温保存

500mLBES Buffered Saline,2X BES Buffered Saline,2X 常温保存

50mLBeta Glycerophosphate Solution（beta-磷酸甘油溶液）,100mMBeta Glycerophosphate Solution,100mM常温保存

250mLBeta-ME-EDTA Solution（beta-巯基乙醇-EDTA溶液） Beta-ME-EDTA Solution 常温保存

250mLBicarbonate Buffer（碳酸氢盐缓冲液），1M,pH8.5 Bicarbonate Buffer，1M,pH8.5 常温保存

250mLBicarbonate Buffer（碳酸氢盐缓冲液）,1M,pH9.0 Bicarbonate Buffer,1M,pH9.0 常温保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH7.4  Bicine Buffer，0.5M,pH7.4  常温保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH8.0  Bicine Buffer，0.5M,pH8.0  常温保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH8.5  Bicine Buffer，0.5M,pH8.5  常温保存

100mLBicine Buffer，0.5M,pH9.0  Bicine Buffer，0.5M,pH9.0  常温保存

100mLBiotin Solution（生物素溶液）,0.02%Biotin Solution,0.02%常温保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.0  常温保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH6.5  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH6.5  常温保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0  常温保存

100mLBis-Tris Buffer,0.2M,pH7.4  Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.4  常温保存

黄曲霉PCR试剂盒

续断苷B化学对照品HPLC≥95%20mg

感觉态细胞二氢大豆苷化学对照品HPLC≥95%20mg

氧化表小檗碱化学对照品HPLC≥95%20mg

宝藿苷V化学对照品HPLC≥98%20mg

宝藿苷VII化学对照品HPLC≥98%20mg

槐黄醇化学对照品HPLC≥98%20mg

鸦胆子素 D化学对照品HPLC≥98%20mg去氢紫堇碱化学对照品HPLC≥98%20mg

1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯化学对照品HPLC≥98%20mg

丹参酮甲酯化学对照品HPLC≥98%20mg

20R-人参皂苷Rg2化学对照品HPLC≥98%20mg

三七素化学对照品HPLC≥98%20mg

齿孔酸; 齿孔菌酸化学对照品HPLC≥96.5%20mg

马兜铃内酰胺A化学对照品HPLC≥98%20mg

注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。