注意事项:
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。产品仅用于科研操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
参数规格:
产品名称:巴西利什曼虫哪家代理
英文名称:Leishmania braziliensis
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,产品仅用于科研按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
产品仅用于科研典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
巴西利什曼虫哪家代理原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
苯甲氧羰酰琥珀酰亚胺/苄基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯/N-(苄氧羰基氧基)琥珀亚胺/N-苄基琥珀酰亚胺碳酸酯/N-苄氧羰氧基丁二酰亚胺/N-(苄羰氧基)丁二酰胺/苄基琥珀酰亚胺基碳酸酯/N-苄氧羰基氧基琥珀酰亚胺/CBZ-OSU/Z-OSU/Z-ONSuBR,99%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13139-17-8RT
硫酸-5-羟色胺肌酐/5-羟色胺肌酸酐硫酸盐/5-羟色胺肌氨酸酐硫酸盐一水合物/5-HTBR,99%500毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,61-47-22~8℃,避光
4-氨基马尿酸钠/对氨基马尿酸钠/4-氨基苯甲酰胺基乙酸钠/4-氨基苯甲酰基甘氨酸钠/对氨马尿酸钠/Sodium 4-aminohippurateBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,94-16-6RT,避光
色胺/3-(2-氨乙基)吲哚/β-吲哚基乙胺/2-(3-吲哚基)乙胺/TryptamineBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,61-54-12~8℃,避光
酪胺盐酸/对羟基苯乙胺盐酸盐/盐酸酪胺/Tyramine hydrochlorideBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,60-19-5RT
亚氨基二乙酸/亚氨二醋酸/N-(羧甲基)甘氨酸/氨二乙酸/二乙酸亚胺/二羧甲基胺/IDABR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,142-73-4RT
甘氨酰-脯氨酰-对硝基苯胺对甲苯磺酸盐/GPDABR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65094-46-0保存:-20℃
五肽胃泌素/五肽促胃液素/N-[(1,1-二甲乙氧基)羰基]-β-丙氨酰-L-色氨酰-L-甲硫氨酰-L-门冬氨酰-L-苯丙酰胺/PentagastrinBR,98%25毫克国产5534-95-22~8℃
O-苯并三氮唑-N,N,N,N,-四甲脲六氟磷酸酯/O-(IH-苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基异脲六氟化磷/苯并三唑-1-四甲基六氟磷酸酯/O-(1H-苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基硫尿六氟磷酸盐/苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/HBTUBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,94790-37-1RT
N-乙酰-L-蛋氨酸/N-乙酰-L-甲硫氨酸/N-乙酰基-L-蛋氨酸/醋酸基甲硫氨酸/L(-)-N-乙酰甲硫氨基丁酸/L(-)-N-乙酰甲硫氨酸/N-乙酰-L-甲硫氨基酸/NAMBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65-82-7RT
L-高精氨酸盐酸盐/L-Homoarginine hydrochlorideBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1483-01-8RT
甘氨酸锌/甘氨酸络合锌/甘氨酸螯合锌/2水甘氨酸锌/Zinc GlycinateBR,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:7214-08-6RT
甘氨酸镁/甘氨酸镁螯合物/Magnesium GlycinateBR,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,14783-68-7RT
甘氨酸钙/甘氨酸钙螯合物/Calcium GlycinateBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,35947-07-0RT
巴西利什曼虫哪家代理双(2-氧代-3-恶唑烷基)次磷酰氯,5gOPHIOPOGONIN D 质量规格:HPLC≥98%,标准品
叔丁氧羰基-甲苯磺酰基-精氨酸,100gDihydroartemisinin 质量规格:>98%
叔丁氧羰基-甲苯磺酰基-精氨酸,25gEthyl fluoroacetate 质量规格:>98%,标准品
叔丁氧羰基-甲苯磺酰基-精氨酸,5gBasic Orange 14 质量规格:>97.0%(LC),*
N-芴甲氧羰基-N'-甲苯磺酰基-L-精氨酸,1g2,3-DIAMINONAPHTHALENE 质量规格:HPLC≥95%,标准品
N-芴甲氧羰基-N'-甲苯磺酰基-L-精氨酸,25gPhytolaccagenin 质量规格:HPLC>98%,标准品
N-芴甲氧羰基-N'-甲苯磺酰基-L-精氨酸,5gCinnamaldehyde 质量规格:>97%,BR
其他生化试剂,1-(4-Chlorophenyl)piperazine dihydrochloride 质量规格:HPLC≥98%,标准品
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