技术特点:
1利什曼原虫通用PCR检测试剂盒价格准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6产品仅用于科研高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
产品名称 | 利什曼原虫通用PCR检测试剂盒价格 |
英文名称 | Leishmania spp.PCR |
分类 | PCR检测试剂盒 |
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 产品仅用于科研本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这05个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记05个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到05个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+141个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+29个PCR管,其中N+141个用于上步得到的N+141个样品,53个用于PCR阴性对照,05个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
N-乙酰-L-赖氨酸/N-Acetyl-L-lysineBR,97%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1946-82-3RT
N-乙酰-L-丙氨酸/N-乙酰-L-α-丙氨酸/N-乙酰基-L-丙氨酸/N-Acetyl-L-alanineBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,97-69-82~8℃
N-乙酰-D-色氨酸/D-α-N-乙酰氨基-β-吲哚丙酸/D-α-N-乙酰胺基-β-吲哚丙酸/N-乙酰基-D-色氨酸/N-Acetyl-D-tryptophanBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,97-69-8保存:-20℃
N-乙酰-D-亮氨酸/N-乙酰-D-白氨酸/N-乙酰基-D-亮氨酸/N-Acetyle-D-LeucineBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,19764-30-8保存:-20℃
N-乙酰-L-脯氨酸/N-Acetyl-L-ProlineBR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,68-95-12~8℃
N-乙酰-D-脯氨酸/N-Acetyl-D-ProlineBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,16395-58-7RT
N-乙酰-L-肉碱盐酸盐/O-乙酰基-L-肉碱盐酸盐/2-乙酰氧基-3-*铵基丁酸氯化物/盐酸乙酰基左卡尼汀/L-乙酰肉碱氯化物/ALC/ALCARBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5080-50-22~8℃
α-酮基缬氨酸钙盐/3-甲基-2-氧丁酸钙盐/3-甲基-2-氧代丁酸钙盐/酮缬氨酸钙/Calcium alpha-ketovalineBR,97%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,51828-94-5RT
芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯/9-芴甲基-N-琥珀酰亚氨基碳酸酯/N-(9氢-氟-2-甲氧基)琥珀酰胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯/FMOC-OSUBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,82911-69-1RT
2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-偶氮苯丙三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/双(二甲基氨基)甲叉-三唑[4,5-B]吡啶3-氧化物六氟磷酸盐/2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯/O-(7-氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/HATUBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,16395-58-72~8℃
CBZ-L-缬氨酸/N-苄氧羰基-L-缬氨酸/N-苄氧羰酰基-L-缬氨酸/N-CBZ-L-ValineBR,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1149-26-4RT
D-异亮氨酸/D-异白氨酸/(2R,3R)-2-氨基-3-甲基戊酸/D-lsoleucineBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,319-78-8RT,避光
β-丙氨酸乙酯盐酸盐/β-丙胺酸乙酯盐酸盐/氨基乙酸乙酯/β-Alanine ethyl ester HC1BR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,4244-84-2RT
L-丙氨酰胺盐酸盐/L-丙胺酰胺盐酸盐/L-Alaninamide hydrochlorideBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,33208-99-0RT
利什曼原虫通用PCR检测试剂盒价格5'-腺嘌呤核苷酸二钠盐,100gPATENT BLUE V 质量规格:HPLC≥95%,标准品
8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸单钠盐,500g3-Aminophenylboronic acid monohydrate 质量规格:工业级
8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸单钠盐,25gTriethoxyvinylsilane 质量规格:HPLC≥98%,标准品
8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸单钠盐,100gNA 质量规格:HPLC≥95%,对照品
N-乙酰-DL-色氨酸,5gwujingan 质量规格:HPLC≥98%,标准品
N-乙酰-DL-色氨酸,25gSodium 2-(7-(3,3-dimethyl-1-(4-sulfonatobutyl)benz(e)indolin-2-ylidene)hepta-1,3,5-trien-1-yl)-3,3-dimethyl-1-(4-sulfonatobutyl)benz[e]indolinium 质量规格:CP
N-乙酰-DL-色氨酸,1g1-TETRADECENE 质量规格:HPLC≥96%,标准品
DMEM高糖(不含酚红),10*1LTetrakis(hydroxymethyl)phosphonium sulfate 质量规格:HPLC≥96%,标准品
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