产品及特点:
1. 产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
产品名称 | 钩端螺旋体通用PCR检测试剂盒多少钱 |
英文名称 | Leptospira spp.PCR |
分类 | PCR检测试剂盒 |
运输及保存:
钩端螺旋体通用PCR检测试剂盒多少钱低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这053个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,产品仅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记053个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到053个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+4642874个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+258874个PCR管,其中N+4642874个用于上步得到的N+4642874个样品,9221个用于PCR阴性对照,053个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
CBZ-L-苯丙氨酸/N-羰苄氧基-L-苯丙氨酸/N-苄氧羰酰基-L-苯丙氨酸/CBZ-L-Phe特纯,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1161-13-3RT
CBZ-D-苯丙氨酸/N-苄氧羰基-D-苯丙氨酸/N-苄氧羰基-D-苯基丙氨酸/Z-D-Phe-OH特纯,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2448-45-5保存:-20℃
CBZ-L-谷氨酸/N-BOC-L-谷氨酸/苯甲氧羰基-L-谷氨酸/N-苄氧羰基-L-谷氨酸/Z-Glu-OHBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1155-62-0RT
CBZ-D-谷氨酸/N-苄氧羰基-D-谷氨酸/N-苄氧羰基-D-氨基戊二酸/CBZ-D-Glu特纯,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,63648-73-7RT
CBZ-L-天冬氨酸/N-苄氧羰基-L-天冬氨酸/苯甲氧羰基-L-天门冬氨酸/CBZ-L-天门冬氨酸/Z-L-aspartic acid特纯,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1152-61-0RT
CBZ-D-天冬氨酸/N-苄氧羰基-D-天冬氨酸/N-CBZ-D-天门冬氨酸/N-苄氧羰基-D-天门冬氨酸/N-Cbz-D-aspartic Acid特纯,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,78663-07-7RT
CBZ-L-精氨酸/N-苄氧羰基-L-精氨酸/CBZ-L-ArgBR,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1234-35-1RT
CBZ-DL-苯丙氨酸/N-苄氧羰基-DL-苯基丙氨酸/N-苄氧羰基-DL-苯丙氨酸/Z-DL-phenylalanine特纯,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3588-57-6RT
CBZ-硫苯基-L-半胱氨酸/N-苄氧羰基-S-苯基-L-半胱氨酸/CBZ-S-苯基-L-半胱氨酸/N-Z-S-phenyl-L-cysteineBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,159453-24-4RT
CBZ-甘氨酸/苄氧羰基甘氨酸/N-羧甲基氨基甲酸苄酯/N-苄氧羰基-甘氨酸/CBZ-L-Gly特纯,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1138-80-3RT
CBZ-L-羟脯氨酸/N-苄氧羰基-L-羟脯氨酸/N-Cbz-Hydroxy-L-proline特纯,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13504-85-3RT
CBZ-L-脯氨酸/N-苄氧羰基-L-脯氨酸/N-羰苄氧基-L-嘌呤/N-CBZ-L-Proline特纯,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1148-11-4RT
CBZ-D-脯氨酸/N-苄氧羰基-D-脯氨酸/Z-D-Pro-OH特纯,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6404-31-5RT
CBZ-L-异亮氨酸/N-苄氧羰基-L-异亮氨酸/N-羰酰苄氧基-L-异亮氨酸/Z-L-IsoleucineBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3160-59-6RT
钩端螺旋体通用PCR检测试剂盒多少钱猪血清,500ml1-AMINOTRIDECANE 质量规格:>99,ALFA原装
鸡血清,100mlLitsea cubeba oil 质量规格:>98,BR
鸡血清,500mlTrimethoprim 质量规格:>98%,BR
狗血清,100mlo-Cresolphthalein Complexone 质量规格:>99%,可用于细胞培养
狗血清,500mlMethyl trioctyl ammonium chloride 质量规格:>99%,BR
猴血清,100ml1,1-Cyclohexanediacetic acid mono amide 质量规格:HPLC>98%,标准品
猴血清,50ml4-Chloro-5-iodopyrimidine 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养
羊血浆,100ml1-Hydroxybenzotriazole hydrate 质量规格:HPLC>98%,标准品
技术特点:
1产品仅用于科研准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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