产品及特点:
1. 产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
产品名称 | 巨球菌PCR检测试剂盒价格 |
英文名称 | Macrococcus spp.PCR |
分类 | PCR检测试剂盒 |
运输及保存:
巨球菌PCR检测试剂盒价格低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这177680个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,产品仅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记177680个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到177680个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+367830843个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+680个PCR管,其中N+367830843个用于上步得到的N+367830843个样品,0817个用于PCR阴性对照,177680个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
小分子量蛋白质标准/小分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子量标准蛋白质/Protein little MW marker6200~66200,粉末,6条带20次/600ug/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白质低分子量标准/低分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳低分子量标准蛋白质/ Mid/SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins14400~97400,粉末,6条带20次/240ug/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
14.4-116kDa分子量MARK/14.4-116kDa Protein Molecular weight Mark14400~116000,液体,7条带2×1毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
19-119kDa预先染色分子量MARK/Prestained Protein Molecular weight Mark19000~119000,液体,6条带2×0.25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白质次高分子标准/次高分子MARK/SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳次高分子量标准蛋白质/SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins43000~200000,粉末,5条带10次/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白质中分子量/中分子量标准蛋白/中分子MARK/Middle range protein MW marker53000~212000,冻干粉175ug/支Pharmacia17-0615-01保存:-20℃
SDS-PAGE蛋白质高分子量/高分子量标准蛋白/高分子MARK/High range protein MW marker67000~669000,冻干粉250ug/支Pharmacia17-0445-01原装保存:-20℃
低范围RNA Ladder/RiboRuler Low range RNA Ladder片段:1000,800,600,400,300,200,100100ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
高范围RNA Ladder/RiboRuler High range RNA Ladder片段:6000,4000,3000,2000,1500,1000,500,200100ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
50bp DNA Ladder/DL50片段:50,100,150,200,250,300,400,500bp50次/300ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
100bp DNA Ladder I/DL100片段:100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1500bp100次/500ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
100bp DNA Ladder Ⅱ/DL3000片段:100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、3000bp50次/300ul/支,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,保存:-20℃
2. 建议凝胶浓度为2-3%琼脂糖凝胶,电泳电压4-10v/cm,电泳时间30-40分钟
植物血球凝集素/植物血凝素/PHABR1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9008-97-32~8℃,避光
巨球菌PCR检测试剂盒价格Monensin decyl ester 质量规格:>98%,BR
2-Indanone 质量规格:>98%,BR
BOC-D-GLU(OTBU)-OH 质量规格:>98%,BR
(S)-(+)-Methyl mandelate 质量规格:>98%,BR
Epichlorohydrin 质量规格:>99%,BR
tert-Butylhydrazine hydrochloride 质量规格:>98%,BR
Vindoline 质量规格:>98%,BR
7-Benzylamino-4-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole 质量规格:>98%,BR
技术特点:
1产品仅用于科研准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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