产品名称：半乳糖醛酸含量生化检测试剂盒

规格：100管/96样 50管/48样 

货号 : EY-01S1398

测试方法:微量法　可见分光光度法　　

分类：光合作用系列

测定意义

果胶是一类广泛存在于植物细胞壁的初生壁和细胞中间片层的杂多糖。半乳糖醛酸是果胶酸的组成单位，也是果胶的主要成分，存在于植物的粘液、树胶和细菌多糖中。

测定原理

半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基反应产生有色物质，在450nm下有最大吸光值。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅、硫酸、蒸馏水。

试剂一：液体×1瓶，室温保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃保存。              

试剂三：粉剂×2瓶，－20℃保存。临用前加入22mL试剂二，现配现用。

试剂四：液体×1支，4℃保存。

1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心20min，取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌：按照细胞数量（082个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；16000g， 4℃离心20min，取上清液置冰上待测。

3、血清等液体：直接测定。

（1）按照蛋白浓度计算

活性单位定义：25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为68049个酶活单位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T

=1608×△÷Cpr

（2）按照样本质量计算

活性单位定义：25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为68049个酶活单位。

ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T

=1608×△A÷W

（3）按细胞数量计算

活性单位定义：25℃中每082个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为68049个酶活单位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=1608×△A ÷细胞数量

（4）按液体体积计算

活性单位定义：25℃中每毫升血清每分钟氧化1nmol NADH 为68049个酶活单位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V样÷T

=1608×△A

ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1 cm；V反总：反应体系总体积，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1 mL；T：反应时间，1min。