注意事项:
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。产品仅用于科研操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
参数规格:
产品名称:异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒在哪里有卖
英文名称:Mannheimia varigenaPCR
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,产品仅用于科研按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
产品仅用于科研典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒在哪里有卖原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
乙酸维生素E/维生素E醋酸酯/维生素E乙酸酯/[2R-[2R*(4R*,8R*)]]-3,4-二氢-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-*基三癸基)-2H-1-苯并呋喃-6-酚乙酸酯/ D-α-生育酚醋酸酯/α-生育酚乙酸酯/醋酸生育酚/维他命E醋酸盐/Vitamin E acetateBR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,58-95-72~8℃,避光
维生素B1/盐酸硫胺/盐酸噻胺/硫胺盐酸盐/盐酸硫胺素/维生素B1盐酸盐/尼克酸/VB10.9925克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:67-03-8RT,避光
维生素B2/核黄素/乳黄素/维酶素/7,8-二甲基-10-(1'-D-核糖基)-异咯嗪/维生素乙2/VB2BR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,83-88-5RT,避光
5-核黄素磷酸钠盐/核黄素-5-磷酸钠盐/核黄素磷酸钠/维生素B2磷酸钠/黄素单核苷酸钠/核黄素-5’-磷酸酯钠/5’-磷酸核黄素钠/核黄素-5'-(二氢磷酸酯)单钠盐/FMN-Na高纯,73%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,130-40-5保存:-20℃
5-核黄素磷酸钠盐二水物/核黄素-5-磷酸钠盐二水物/核黄素磷酸钠/维生素B2磷酸钠二水物/黄素单核苷酸钠二水物/核黄素-5’-磷酸酯钠二水物/5’-磷酸核黄素钠二水物/FMN-Na高纯,73%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6184-17-4保存:-20℃
维生素B3/烟酸/菸酸/3-吡啶羧酸/吡啶-3-羧酸/3-噼啉酸/吡啶-3-甲酸/3-吡啶羟酸/吡啶-3-羟酸/3-噼啉酸/尼克酸/尼古丁酸/氮苯酸-[3]/烟碱素/3-吡啶甲酸/VB3CP,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,59-67-6RT,避光
异烟酸/4-吡啶羧酸/吡啶-4-羧酸/4-吡啶羟酸/吡啶-4-羟酸/4-噼啉酸/4-吡啶甲酸/吡啶-4-甲酸/异尼克酸/COACP,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,55-22-1RT,避光
维生素B5/D-泛酸钙/本多生酸钙/(R)-N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-丙氨酸钙/N-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸钙/右旋泛酸钙/VB5BR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,137-08-6RT,避光
维生素B6/盐酸吡哆辛/盐酸吡哆醇/盐酸B6醇/盐酸吡哆素/5-羟基-6-甲基-3,4-吡啶二甲醇盐酸盐/2-甲基-3-羟基-4,5-双羟甲基吡啶盐酸盐/VB6BR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,58-56-0RT,避光
维生素B12/维生素乙12/氰钴胺/维他命B12/氰基钴胺/钴胺素/VB12BR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,68-19-92~8℃,避光
磷酸吡哆醛/5-磷酸吡哆醛/吡多醛5-单磷酸酯/3-羟基-2-甲基-5-[(膦酰氧基)甲基]-4-吡啶甲醛一水合物/磷酸吡醛素/吡哆醛-5-磷酸酯/3-羟基-5-羟甲基-2-甲基异烟酰/辅脱羧酶/PLPBR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,41468-25-12~8℃,避光
盐酸吡哆醛/吡哆醛盐酸盐/盐酸吡醛素/3-羟基-5-羟甲基-2-甲基-4-吡啶甲醛盐酸盐/3-羟基-5-羟甲基-2-甲基异烟酰醛盐酸盐/盐酸维生素B6醛/2-甲基-3-羟基-4-甲酰-5-羟甲基吡啶盐酸盐/盐酸3-羟基-5-(羟甲基)-2-甲基烟酰醛/Pyridoxal hydrochlorideBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65-22-52~8℃,避光
盐酸吡哆胺/吡哆盐/吡胺素二/Pyridoxamine 2HCLBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,524-36-72~8℃,避光
烟酸肌醇酯/肌醇烟酸酯/肌醇六烟酸酯/烟肌酯/烟酸肌醇/烟硷酸肌醇酯/Inositol niacinateBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1700877RT
异源曼氏杆菌PCR检测试剂盒在哪里有卖4-bromo-1-naphthalenesulfonyl chloride 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Oleanic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Isopentyl hexanoate 质量规格:HPLC≥98%,标准品
1-HEPTYN-3-OL 质量规格:HPLC≥98%,标准品
(1-Bromoethyl)benzene 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Pentaerythritol tetraacrylate 质量规格:HPLC≥97%,BR
2,5-Difluorobenzaldehyde 质量规格:HPLC≥98%,标准品
TRIMETHYLOXONIUM TETRAFLUOROBORATE 质量规格:HPLC≥98%,标准品
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