产品及特点:
1. 产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
产品名称 | 传染性软疣病毒PCR检测试剂盒哪家代理 |
英文名称 | Molluscum Contagiosun Virus(MCV)PCR |
分类 | PCR检测试剂盒 |
运输及保存:
传染性软疣病毒PCR检测试剂盒哪家代理低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这87个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,产品仅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记87个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到87个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+13个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+47957311个PCR管,其中N+13个用于上步得到的N+13个样品,7311个用于PCR阴性对照,87个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
甲酸钠/甲酸钠盐/蚁酸钠/二水甲酸钠/雷酸钠/Sodium formateAR,99.5%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,141-53-7RT
月桂酸钠/十二酸钠/Sodium dodecanoateCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,629-25-4RT
油酸钠/十八烯酸钠/(Z)-9-十八烯酸钠盐/9-十八烯酸钠/十八碳烯-[9]-酸钠/顺式-9-十八烯酸钠盐/顺-9-十八烯酸钠盐/Sodium oleateCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,143-19-1RT
吡咯烷二硫代甲酸钠/吡咯烷二硫代氨基甲酸钠/四亚甲基二硫代氨基甲酸钠/1-吡咯烷二硫代羧酸钠盐/1-吡咯烷二硫代甲酸钠盐/四次甲基二硫代氨基甲酸钠/Pyrrolidine dithiocarboxylic acid sodium salt dihydrateAR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,872-71-9RT
硬脂酸钠/十八酸钠/Sodium stearateCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,822-16-2RT
硫代乙醇酸钠/巯基乙酸钠/Sodium thioglycolateAR,80%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,367-51-1RT,避光
聚丙烯酸钠/2-丙烯酸钠均聚物/PAASCP,40%1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:9003-04-7RT,避光
4-氨基酚/对氨基酚/4-氨基苯酚/对氨基苯酚/4-羟基苯胺/4-氨基-1-羟基苯/对羟基苯胺/P-氨基苯酚/4-AminophenolCP50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,123-30-8RT,避光
三碘季铵酚/加拉碘铵/2-[2,6-双(2-三乙基铵乙氧基)苯氧基]乙基三乙基铵三碘化物/驰肌碘/碘化浸酚铵/Gallamine triethiodideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65-29-22~8℃
3,5-二羟基甲苯/水合5-甲基间苯二酚/3,5-甲苯二酚/甲基树脂酚/苔黑酚/苔黑素/5-甲基间苯二酚/俄耳辛/衣酚/地衣酚/3,5-二羟基甲苯一水物/5-甲基-1,3-苯二酚/台黑酚/3,5-DihydroxytolueneCP,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,6153-39-5RT,避光
4-乙酰氨基酚/对乙酰氨基酚/对乙酰氨基苯酚/扑热息痛/N-乙酰对氨基酚/对羟基乙酰苯胺/N-(4-羟基苯基)乙酰胺/醋氨酚/对羟基苯基乙酰胺/APAPCP,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,103-90-2RT,避光
香芹酚/香荆芥酚/异丙基甲苯酚/羟基异丙基甲苯/香旱芹菜酚/香旱芹子油酚/异丙基邻甲酚/2-甲基-5-异丙基-1-苯酚/5-异丙基-2-甲基苯酚/2-甲基-5-异丙基苯酚/异百里酚/2-对伞花酚/2-羟基对伞花烃/2-羟基对异丙基甲苯/CarvacrolFCC, Kosher,98%25克进分499-75-2RT
丁香油酚/丁子香酚/丁香酚/丁子香酸/4-烯丙基-2-甲氧基苯酚/2-甲氧基-4-烯丙基酚/4-烯丙基愈疮木酚/2-甲氧基-4-(2-丙烯基)苯酚/烯丙基甲氧基苯酚/EugenolCP,98%25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,97-53-0RT,避光
2-甲氧基酚/愈创木酚/2-甲氧基苯酚/甲基儿茶酚/邻羟基苯甲醚/邻甲氧基苯酚/2- MethoxyphenolCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:90-05-1RT,避光
传染性软疣病毒PCR检测试剂盒哪家代理Dextran blue 2000 质量规格:HPLC≥98%,标准品
4-Methyl-3-nitropyridine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
2-Dimethylaminopyridine 质量规格:HPLC≥98%,标准品
2-Methyl-1-butanol 质量规格:HPLC≥98%,标准品
4-AMINO-2-METHYLMERCAPTOQUINAZOLINE 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Ozagrel 质量规格:HPLC≥98%,标准品
3',4'-Dimethylacetophenone 质量规格:HPLC≥98%,标准品
BOC-L-Proline 质量规格:HPLC≥98%,标准品
技术特点:
1产品仅用于科研准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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