注意事项:
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。产品仅用于科研操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
参数规格:
产品名称:小鼠白血病病毒PCR检测试剂盒价格
英文名称:Mouse Leukemia Virus(MLV)RTPCR
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,产品仅用于科研按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
产品仅用于科研典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
小鼠白血病病毒PCR检测试剂盒价格原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
癸二酸二甲酯/皮脂酸二甲酯/泌脂酸二甲酯/Dimethyl sebacateCP,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-79-6RT
邻苯二甲酸二壬酯/邻苯二甲酸壬酯/邻酞酸二壬酯/1,2-苯二甲酸二壬酯/增塑剂DNP/DNPAR,96%25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84-76-4RT
邻苯二甲酸二正辛酯/苯二甲酸二辛酯/邻酞酸二正辛酯/增塑剂DOP/邻苯二酸二辛酯/邻苯二甲酸二辛酯/DOPAR,99%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,117-84-0RT
癸二酸二正辛酯/皮脂酸二正辛酯/硬脂酸异辛酯/癸二酸二异辛酯/十八酸异辛酯/Di-n-octyl sebacateCP,99%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,27214-90-0RT
乙酰乙酸乙酯/丁酮酸乙酯/3-氧代丁酸乙基酯/乙酰醋酸乙脂ACE/乙基乙酰乙酸/EAACP500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,141-97-9RT
正庚酸乙酯/庚酸乙酯/水芹酸乙酯/科涅克油/葡萄子油/Ethyl heptanoateCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-30-9RT
月桂酸乙酯/十二酸乙酯/十二烷酸乙酯/Ethyl laurateCP,98.5%250毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-33-2RT
正辛酸乙酯/辛酸乙酯/羊脂酸乙酯/亚羊脂酸乙酯/Ethyl octanoateCP,98%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,106-32-1RT
油酸乙酯/十八烯酸乙酯/(Z)-9-十八烯酸乙酯/9-十八烯酸乙酯/油酸乙基酯/顺-9-十八烯酸乙酯/Ethyl oleateLR,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-62-6RT,避光
硬脂酸乙酯/十八酸乙酯/硬酯酸乙酯/十八碳酸乙酯/Ethyl stearateCP50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-61-5RT
对甲苯磺酸乙酯/4-甲苯磺酸乙酯/乙基-4-甲基苯磺酸酯/4-甲基苯磺酸乙酯/对甲苯磺酰乙酯/Ethyl p-toluene sulfonateCP,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,80-40-0RT
三乙酸甘油酯/甘油三乙酸酯/三醋酯/三醋酸甘油酯/丙三醇三乙酸酯/醋酸甘油酯/三醋精/1,2,3-丙三醇三乙酸酯/甘油三醋酸酯/甘油三乙醇酯/Glyceryl triacetateAR,98.5%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,102-76-1RT
油酸甘油酯/甘油单油酸酯/9-十八烯酸(Z)-2,3-二羟基丙酯/单油酸甘油酯/甘油单油酸酯/一油酸甘油酯/甘油油酸酯/MonooleinAR,40%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-03-5RT
三油酸甘油酯/甘油三油酸醋/(Z)-9-十八烯酸-1,2,3-丙三基酯/三油精/三苯基氯化四唑/油酸三甘酯/丙三醇三甘油酸酯/油精/甘油三油酸酯/Glycerol trioleateCP,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,122-32-7RT
小鼠白血病病毒PCR检测试剂盒价格Ethylcyclohexane 质量规格:TLC≥97%,标准品
Origanum oil 质量规格:>97%,BR
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