运输及保存:
产品仅用于科研低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
产品名称 | 堪萨斯分枝杆菌PCR检测试剂盒哪家代理 |
英文名称 | Mycobacterium kansasiiPCR |
分类 | PCR检测试剂盒 |
技术特点:
1堪萨斯分枝杆菌PCR检测试剂盒哪家代理准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4产品仅用于科研简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这134个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记134个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到134个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+502433个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+433个PCR管,其中N+502433个用于上步得到的N+502433个样品,07个用于PCR阴性对照,134个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
紫脲酸/紫尿酸/紫巴比土酸/5-异亚硝基巴比土酸/中草酸二酰脲-5-肟/5-(羟基亚氨基)巴比土酸/丙酮二酰脲-5-肟/5-亚硝基-2,4,6-三羟基嘧啶/四氧嘧啶-5-肟/Violuric acid monohydrate特纯,97%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,26351-19-9RT,避光
氯铂酸/氯化铂/铂氯氢酸/六氯合铂(IV)酸/六氯合铂酸/氯铂酸六水合物/六氯铂(Ⅳ)酸六水合物/六氯合铂酸/二氢六氯化铂/Hexachloroplatinic(Ⅳ) acid hexahydrateAR,37%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,18497-13-7RT,避光
氧化铁/三氧化二铁/红色氧化铁/氧化高铁/205铁红/磁性氧化铁红/烧褐铁矿/铁丹/红粉/威尼斯红/Iron(III)oxideAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1309-37-1RT
硫酸铁/硫酸高铁/硫酸铁(III)/Ferric sulfateAR,21-23%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15244-10-7或10028-22-5RT,避光
硫化亚铁/硫化铁/硫铁/硫化铁(Ⅱ)/一硫化铁/Ferrous sulfideCP,70%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1317-37-9RT
氢氧化铁/有水氧化铁/三氢氧化铁/Ferric hydroxideCP500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1309-33-7RT
四氧化三铁/磁性氧化铁/黑色氧化铁/磁铁矿/氧化正亚铁/精磁铁砂/氧化铁黑/Ferrosoferric oxideCP,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1317-61-9RT
钛铁试剂/邻苯二酚-3,5-二磺酸钠/钛铁试剂/试钛灵/1,2-二羟基苯-3,5-二磺酸钠/4,5-二羟基-1,3-苯二磺酸二钠盐/1,2-二羟基-3,5-苯二磺酸二钠盐/TironAR25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,149-45-1RT
硫化铅/方铅矿/硫化铅晶体/硫酸铅(II)/Lead(II)sulfideSP5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1314-87-0RT
硬脂酸铅/十八酸铅/十八酸铅盐/硬酯酸铅/二盐基性硬脂酸铅/双(十八酸)二氧化二铅/二盐基硬脂酸铅/Lead(II)stearateCP,26.2%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,56189-09-4RT
溴化锂/二水合溴化锂/Lithium bromide dihydrateCP,95%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,85017-82-9RT
碳酸锂/Lithium CarbonateAR,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,554-13-2RT
偏硼酸锂/Lithium metaborate octahydrateCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,15293-74-0RT
磷酸锂/Lithium phosphate hemihydrateCP,97%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10377-52-3RT
堪萨斯分枝杆菌PCR检测试剂盒哪家代理Indole-3-carboxaldehyde 质量规格:HPLC≥98%,标准品
N,N-DIMETHYL-M-PHENYLENEDIAMINE DIHYDROCHLORIDE 质量规格:HPLC≥98%,标准品
2,4,6-Collidine 质量规格:>98%
Chromium 质量规格:HPLC≥98%,标准品
NA 质量规格:HPLC≥98%,标准品
2-Iodoxybenzoic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品
Tetraphenylphosphonium bromide 质量规格:HPLC≥98%,标准品
2-Methyl-5-nitroimidazole 质量规格:HPLC≥98%,标准品
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