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吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化检测试剂盒

型 号

产品时间2023-11-06

所属分类氨基酸代谢系列

报价550

产品描述:吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化检测试剂盒是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中代谢因其初始底物不同,分为( Glu) 和( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以为前体合成途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。

产品概述

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产品名称:吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化检测试剂盒

规格:100/48 50/24 

货号 : EY-01S1114

测试方法:微量法 可见分光光度法  

分类:氨基酸代谢系列

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测定意义:                         

是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中代谢因其初始底物不同,分为( Glu) ( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以为前体合成途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。

测定原理:

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水

 



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试剂一:液体×1瓶,室温保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。              

试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。临用前加入22mL试剂二,现配现用。

试剂四:液体×1支,4℃保存。

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1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。

2、细菌、真菌:按照细胞数量(80个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。

3、血清等液体:直接测定。

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(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为772个酶活单位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为772个酶活单位。

ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T

=1608×△A÷W

(3)按细胞数量计算

活性单位定义:25℃中每80个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为772个酶活单位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T

=1608×△A ÷细胞数量

(4)按液体体积计算

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