产品及特点:
1. 产品仅用于科研即开即用,用户只需要提供伴放线放线杆菌样品。
2. 根据伴放线放线杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
产品名称 | 侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒哪家代理 |
英文名称 | Pasteurella pneunotropicaPCR |
分类 | PCR检测试剂盒 |
运输及保存:
侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒哪家代理低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
自备试剂
DNA模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法:
一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这9914个10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,产品仅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 标记9914个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到9914个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
二、样品DNA的制备
8. 如果有N个样品,必须设置N+40个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。
9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒DNA提取试剂盒兼容。
三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)
10. 如果只做1次重复,则标记N+733个PCR管,其中N+40个用于上步得到的N+40个样品,914个用于PCR阴性对照,9914个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。
11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
磷铵英文名称: Triammonium phosphate trihydrate其他名称: Phosphoric acid triammonium salt monohydrate产品规格: CP,95%包装:500克CAS号:25447-33-0N3H12O4P·3H2O=203.13
柠檬铵其他名称: 枸橼铵;柠檬三铵;柠檬三铵英文名称: Triammonium citrate其他名称: Citric acid triammonium salt;Triammonium citrate产品规格: AR,98.5%包装:500克产品规格: GR,99%
硫铁铵英文名称: Ammonium ferric sulfate dodecahydrate其他名称: Ammonium iron(III) sulfate dodecahydrate;Ferric ammonium sulfate产品规格: AR,99%包装:500克CAS号:7783-83-7H4FeNO8S2·12H2O=482.20
硫亚铁铵英文名称: Ferrous ammonium sulfate hexahydrate其他名称: Ammonium iron(Ⅱ) sulfate hexahydrate;Ferrous alum;Ferrous ammonium sulfate;Mohr’salt产品规格: AR,99.5%包装:500克CAS号:7783-85-9H8FeN2O8S2·6H2O=392.14
硫铝铵英文名称: Aluminum ammonium sulfate其他名称: Ammonium alum;Ammonium aluminum sulfate产品规格: AR,99.5%包装:500克CAS号:7784-26-1AINH4S2O8·12H2O=453.32
碳氢铵英文名称: Ammonium bicarbonate其他名称: Ammonium acid carbonate;Ammonium hydrogen carbonate产品规格: AR,98%包装:500克CAS号:1066-33-7CH5NO3=79.05
重硫铵英文名称: Ammonium bisulfate其他名称: Ammonium acid sulfate;Acid ammonium sulfate产品规格: AR,41.5%包装:500克CAS号:7803-63-6NH5SO4=115.11
铵英文名称: Ammonium borate其他名称: Ammonium meta-borate;Ammonium tetraborate产品规格: CP,99%包装:250克CAS号:12007-58-8NH4HB4O7·3H2O=228.33
侵肺巴斯德菌PCR检测试剂盒哪家代理Methyl L-leucinate hydrochloride 质量规格:>95%,BR
O-Phthalimide 质量规格:>95%,BR
Sulfuryl chloride 质量规格:>95%,BR
1-(4-CHLORO-PYRIDIN-2-YL)-PIPERAZINE 质量规格:>95%,BR
(+)-2,2'-METHYLENEBIS[(3AR,8AS)-3A,8A-DIHYDRO-8H-INDE,2-D]OXAZOLE] 质量规格:>95%,BR
2-Amino-5-guanidinovaleric acid monohydrochloride 质量规格:>95%,BR
Benzyl methacrylate 质量规格:>95%,BR
3-(2-Aminoethylamino)propyl-dimethoxymethylsilane 质量规格:>95%,BR
技术特点:
1产品仅用于科研准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果*性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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