Rat MIP-3αElisaKit
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆及相关液体
性能:
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
原理:
采用双抗体夹心法测定MTHFD2水平。用纯化的MTHFD2抗体包被微孔板,制成固相载体,实验时依次在微孔板中加入样本及标准品,并加入 HRP 标记的 ABP 抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,反复洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。颜色的深浅和样品中的 ABP含量呈正相关。采用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度(OD 值),根据标准曲线,计算测试样品中 ABP 浓度。
试剂盒组成:
结果判断与分析:
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的待测物质标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
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操作步骤:
1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。
2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准
品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul
的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸拍干。
7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。
9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。
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