产品名称 | FITC标记的磷酸化自噬相关蛋白3抗体 | 英文名称 | Anti-phospho-ATG3 (Tyr18)/FITC |
规 格 | 0.2ml/200μg | 货号 | EY-0361K |
浓 度 | 1mg/1ml | 抗体来源 | Rabbit |
亚 型 | IgG | 性 状 | Lyophilized or Liquid |
研究领域 | 肿瘤 细胞生物 神经生物学 信号转导 线粒体 泛素 | 产品类型 | 标记一抗 |
理论分子量 36kDa
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit,
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human ATG3 around the phosphorylation site of Tyr18
纯化方法 affinitypurified by Protein A
储 存 液 0.01M TBSpH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
产品应用 IF=1:50-200
not yet tested inother applications.
optimaldilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year.
别 名 2610016C12Rik; Apg 3; APG3; APG3 autophagy 3 like; APG3 like; APG3-like; APG3L; Apg3p; ATG 3; ATG3; ATG3 autophagy related 3 homolog; ATG3 autophagy related 3 homolog (S. cerevisiae); ATG3_HUMAN; Autophagy Apg3p/Aut1p like; Autophagy related protein 3; Au⚃퀨⚃
一抗可用于检测糖尿病、癌症、阿尔茨海默病和帕金森病的生物标志物。二抗则主要用于检测和纯化抗原蛋白。
二抗在标记和检测方面比较灵敏和灵活。所以,它们在流式细胞术、蛋白质印迹和细胞成像等一系列应用中用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。二抗类型的选择基于一抗的类别:免疫球蛋白 IgG 或 IgM、标签类型和来源宿主。
由于大多数一抗是使用少数宿主物种开发的,并且大多数一抗属于 IgG 类,因此制造商通常提供可用于许多不同检测程序和系统的即用型二抗。常用的二抗有抗兔 IgG、抗小鼠 IgG、抗鸡 IgG 或抗山羊 IgG。所选择的二抗应始终能够识别产生一抗的宿主物种,例如,为了检测从小鼠产生的一抗,使用抗小鼠二抗。在 ELISA 和蛋白质印迹中,标记通常是化学发光、比色或基于荧光的,但在流式细胞术和免疫荧光中,仅使用荧光标记。
一、 免疫动物选择
根据需要产生目标抗原的免疫反应,选择合适的免疫动物。例如,小鼠是免疫动物之一,因其易于操作且在免疫应答方面较为强大。
二、抗原免疫
将目标抗原注射到免疫动物体内,通常需要多次免疫以激发免疫反应。可以选择不同的免疫路线,如皮下、腹腔、静脉等。
三 、细胞融合
从免疫动物获得脾细胞或淋巴细胞,与骨髓瘤细胞或其他癌细胞(如SP2/0、NS0等)融合,形成杂交瘤细胞。融合细胞通常使用(PEG)或电穿孔等方法促进细胞融合。
四、 杂交瘤细胞筛选
对融合细胞进行筛选,一般使用HAT选择性培养基,通过对非杂交瘤细胞和单克隆杂交瘤细胞的抗代选择,筛选出产生目标抗体的单克隆杂交瘤细胞。
五、 单克隆抗体生产
从筛选出的单克隆杂交瘤细胞中获取单一细胞系,并进行大规模培养和产生抗体。一般可采用体外或体内方式生产单克隆抗体。
六、抗体纯化
通过不同的方法对产生的单克隆抗体进行纯化,去除杂质,例如使用蛋白A/G层析、蛋白L层析、蛋白G层析等。
七、 鉴定和验证
对纯化后的单克隆抗体进行鉴定和验证,例如使用酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫印迹(Western blotting)等方法,确定其免疫特异性和活性。
八、应用
将制备好的单克隆抗体应用于具体的研究、诊断或治疗等领域,例如免疫组化、流式细胞术、免疫疫治疗等。
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