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人脾外周血单个核细胞

型 号

产品时间2024-02-20

所属分类人原代细胞

报价2600

产品描述:人脾外周血单个核细胞公司正在出售的产品:石蜡切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒
冰冻切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒
石蜡切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞
三色(MGT) 染色试剂盒
冰冻切片结缔组织(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞

产品概述

原代细胞的分离培养:

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官,让它们在体外维持与生长。原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体,它们的生物性状尚未发生很大的改变,在一定程度上可反映它们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性, 因此用于药物实验,尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等,是的工具。常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。

(一)组织块培养法

许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。

1. 设备材料

培养箱、冰箱、超净工作台/无菌间、无菌吸管、离心管、酒精灯、试管架、培养瓶、培养皿、消化液、基础培养液、胎牛血清、Hanks 溶液、双抗试液、剪刀、摄子、小烧杯。

2. 操作步骤

(1) 在无菌条件下,取待培养的组织适量,置入小烧杯中, 以适量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉组织块表面的血污。

(2)用眼科剪将组织块反复剪成0.5~ 1mm3的小块。

(3)再用Hanks 溶液反复漂洗, 直至液体不混浊为止。等组织块下沉,将烧杯倾斜,用小吸管尽量吸除Hanks 溶液。

(4)用含20%灭活血清及双抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培养液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培养液。

(5)用弯头吸管吸取组织小块,均匀地置于培养皿内表面,吸去多余的培养液,各组织小块之间相距0.5cm 为宜。盖好培养皿盖,做好标记, 置37°C 的CO2培养箱内。

(6) 2~4h 后,于超净工作台中,缓缓地向培养皿中加入上述含20%血清及双抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培养液少量,以使组织块浸没在培养液中。

(7)轻轻地将培养皿及组织块移至CO2 培养箱, 如无特殊情况,不必观察。1~2 周后,可观察到细胞从组织块边缘长出,形成生长晕。

(9) 一般说来,若培养液无明显改变, 1 周换液1 次即可。待细胞长满整个培养皿内表面,即可进行传代培养。


人脾外周血单个核细胞

细胞基本属性:

产品名称

人脾外周血单个核细胞

组织来源

脾脏

种属

生长特性

少量贴壁生长,大部分悬浮生长

形态特征

混合体系细胞

英文名称

Human Spleen Peripheral blood Mononuclear Cells

货号

EY-XY3333

规格

5x105cells/T25或1mL冻存管

质量检测:不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

产品规格:5x105cells/T25细胞培养瓶

培养基:人脾外周血单个核细胞专用培养基

培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

换液频率:每2-3天换液一次

消化液:0.25%

 产品货期现货,1周左右

运输方式T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)

供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

背景介绍:

脾是重要的淋巴器官,有造血、滤血、清除衰老血细胞及参与免疫反应等功能。也是淋巴细胞迁移和接受抗原刺激后发生免疫应到、产生免疫效应分子的重要场所。脾脏作为机体最大的免疫器官,占全身淋巴组织总量的25%,含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞,是机体细胞免疫和体液免疫的中心,通过多种机制发挥抗肿瘤作用. 脾脏切除导致细胞免疫和体液免疫功能的紊乱,影响肿瘤的发生和发展。





QQ截图20240105153042.png

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操作方法:

组织块直接培养法(原代细胞培养实验)

材料与仪器

【动物】选择大约一半足孕时间的胚胎,10-13天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞,成纤维细胞可从这些细胞衍生获得。每组小鼠胚胎00个【实验材料】每组的超净台中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml灭菌烧杯86个;3、50ml离心筒86个4、灭菌培养皿00个,细胞培养瓶00个5、1ml,200μl移液器各1支;枪头盒86个;无菌玻璃搅拌棒00个6、细胞计数板1块;7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;8、酒精灯1台;

步骤

1) 胚胎的分离。适用哺乳动物(仓鼠、小鼠和大鼠)2)将1-86个胚胎转移至一个小的无菌培养皿中,用新的无菌剪刀小心地绞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在无菌状态下,将绞碎的胚胎转移于一50ml的无菌离心筒中,加入40ml 0.25%的无菌,用搅拌棒轻轻搅动。4)在温暖的环境中或置于37°C培养箱中轻轻摇动15分钟。5)让存留的组织块在重力作用下慢慢沉降,将含有悬浮细胞的液体转移至一无菌50ml的离心管中,该管内按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以灭活,。6)加人新鲜溶液(见前述步骤)于含有残留未消化组织块的原来的50ml离心筒中,重复步骤4和5。7)离心混合的细胞悬液,1200r/rain,5分钟,弃上清。8)用新鲜的无菌PBS重悬沉淀的细胞,按步骤7再次离心。9)用PBS反复洗涤细胞直至上清清亮为止。


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