收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态最佳
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是050078个T25瓶传50078个T25瓶或者50078个6cm皿。不是050078个T25瓶传50078个10cm皿
传代方法
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
产品名称 | 大鼠海绵体平滑肌细胞 | 货号 | EY-XY3459 |
英文名称 | Rat Sponge Smooth Muscle Cells | 规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 |
质量检测:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
培养基:大鼠海绵体平滑肌细胞培养基
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%
产品货期现货,1周左右
运输方式T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
大鼠海绵体平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,大鼠海绵体平滑肌细胞分离自海绵体组织;海绵体,又称海绵体肌,是最硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织,外面包有坚厚的白膜,内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架,其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。 |
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
血管内皮钙粘蛋白抗体
细胞组织E(CATHEPSIN E)活性荧光定量检测试剂盒
冰冻切片组织组蛋白荧光显微镜检测试剂盒
pPICZ+目的基因
细胞CYTOCHROME C蛋白表达比色法定量检测试剂盒
血液O链接硫酸酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量阿尔新蓝(alcian blue)比色法定量检测试剂盒
线粒体超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分离试剂盒
组织短链脂酰合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)
ACTIVATED PC
组织甘肽合成酶活性比色法定量检测试剂盒
细胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR扩增检测试剂盒
载玻片细胞CASPASE-2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
肉类尿素比色法定量检测试剂盒
细胞免疫荧光显微镜间接检测试剂盒(含一抗和荧光二抗)
细胞ROCK-I激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒
中心体蛋白70/p10结合蛋白抗体
转胺酶1抗体
溶质载体家族22成员14抗体
MCF2变换序列样蛋白2抗体
细胞周期后期促进蛋白亚基11抗体
白蛋白(内参)抗体
磷酸化CD19抗体
大鼠海绵体平滑肌细胞CD23/FcεRII重组兔单克隆抗体
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