收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态最佳
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是46个T25瓶传9276个T25瓶或者9276个6cm皿。不是46个T25瓶传9276个10cm皿
传代方法
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
产品名称 | 小鼠肺微血管内皮细胞 | 货号 | EY-XY3633 |
英文名称 | Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 |
质量检测:血管假性血友病因子(vWF)免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
培养基:小鼠肺微血管内皮细胞培养基
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%
产品货期现货,1周左右
运输方式T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
小鼠肺微血管内皮细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,小鼠肺微血管内皮细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。 |
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
信号转导和转录激活因子7抗体
体液环氧化酶(CYCLOOXYGENASE)总活性比色法定量检测试剂盒
高质纯化聚丙烯酰胺凝胶粉碎法胶回收试剂盒
10倍酵母菌SD-URA培养基(半乳糖+棉籽糖)
ER BETA 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
通用型鸡新城疫(Newcastle Disease Virus;NDV)
细胞果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALD)定量检测试剂盒
动物组织总ATP酶(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒
细胞超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒
冰冻切片碱性磷酸酶活性染色试剂盒
动物细胞醛酮还原酶1A(aldo-keto reductase 1A)活性比色法定量检测试剂盒
细胞P27蛋白表达荧光定量检测试剂盒
饮料甲酸比色法定量检测试剂盒
分子级溴化乙锭(Ethidium Bromide)染色液
细胞Akt2/PKBβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
细胞II型L-3羟酰基-CoA 脱氢酶/β淀粉样蛋白结合乙醇脱氢酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量检测试剂盒
整合素αM单克隆抗体
干扰素调节因子7抗体
热休克蛋白90α重组兔单克隆抗体
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细胞色素P450 11A1抗体
β链接素相互作用蛋白1抗体
类表皮生长因子域7抗体
小鼠肺微血管内皮细胞Bcl-2抗体
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