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猫外周血和脐带血DC细胞

型 号

产品时间2024-02-27

所属分类其它类原代细胞

报价2600

产品描述:猴组织DC细胞公司正在出售的产品:0酸化T淋巴细胞连接蛋白抗体 隐花色素蛋白1抗体
蛋白酪激酶ATK抗体
0酸化细胞死亡调解子抗体 吲哚乙酸抗体/植物生长素抗体
Bcl-10抗体 吲哚乙酸/植物生长素单克隆抗体
原癌基因Bcl-6抗体 吲哚胺2,3-双加氧酶抗体

产品概述

原代细胞的分离培养:

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官,让它们在体外维持与生长。原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体,它们的生物性状尚未发生很大的改变,在一定程度上可反映它们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性, 因此用于药物实验,尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等,是的工具。常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。

(一)组织块培养法

许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。

1. 设备材料

培养箱、冰箱、超净工作台/无菌间、无菌吸管、离心管、酒精灯、试管架、培养瓶、培养皿、消化液、基础培养液、胎牛血清、Hanks 溶液、双抗试液、剪刀、摄子、小烧杯。

2. 操作步骤

(1) 在无菌条件下,取待培养的组织适量,置入小烧杯中, 以适量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉组织块表面的血污。

(2)用眼科剪将组织块反复剪成0.5~ 1mm3的小块。

(3)再用Hanks 溶液反复漂洗, 直至液体不混浊为止。等组织块下沉,将烧杯倾斜,用小吸管尽量吸除Hanks 溶液。

(4)用含20%灭活血清及双抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培养液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培养液。

(5)用弯头吸管吸取组织小块,均匀地置于培养皿内表面,吸去多余的培养液,各组织小块之间相距0.5cm 为宜。盖好培养皿盖,做好标记, 置37°C 的CO2培养箱内。

(6) 2~4h 后,于超净工作台中,缓缓地向培养皿中加入上述含20%血清及双抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培养液少量,以使组织块浸没在培养液中。

(7)轻轻地将培养皿及组织块移至CO2 培养箱, 如无特殊情况,不必观察。1~2 周后,可观察到细胞从组织块边缘长出,形成生长晕。

(9) 一般说来,若培养液无明显改变, 1 周换液1 次即可。待细胞长满整个培养皿内表面,即可进行传代培养。


猫外周血和脐带血DC细胞

细胞基本属性:

产品名称

猫外周血和脐带血DC细胞

组织来源

外周血和脐带血

种属

生长特性

半悬浮生长

分离方法

通过密度梯度离心获得

英文名称

cat Peripheral   Blood and Cord Blood DC cells

货号

EY-XY4001

规格

5x105cells/T251mL冻存管

细胞鉴定:经鉴定细胞纯度高于90%

支原体检测:猫外周血和脐带血DC细胞不含有 HIV-1 HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌

产品规格:5×105cells/T251mL冻存管

培养基:猫外周血和脐带血DC细胞专用培养基

培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37

冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

细胞代数:第1

产品货期现货,1周左右

运输方式T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)

供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

背景介绍:

树突状细胞(Dendritic cells, DC)是机体功能强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原,未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始型T细胞,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。DC的来源有两条途径:①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC,称为髓样DC,也称DCl,与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞;包括朗格汉斯细胞,间皮(或真皮)DCs以及单核细胞衍生的DCs等,②来源于淋巴样干细胞,称为淋巴样DC或浆细胞样DC,即DC2,与T细胞和和脐带血DC细胞






QQ截图20240105153042.png

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操作方法:

组织块直接培养法(原代细胞培养实验)

材料与仪器

【动物】选择大约一半足孕时间的胚胎,10-13天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞,成纤维细胞可从这些细胞衍生获得。每组小鼠胚胎76个【实验材料】每组的超净台中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml灭菌烧杯2923953个;3、50ml离心筒2923953个4、灭菌培养皿76个,细胞培养瓶76个5、1ml,200μl移液器各1支;枪头盒2923953个;无菌玻璃搅拌棒76个6、细胞计数板1块;7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;8、酒精灯1台;

步骤

1) 胚胎的分离。适用哺乳动物(仓鼠、小鼠和大鼠)2)将1-2923953个胚胎转移至一个小的无菌培养皿中,用新的无菌剪刀小心地绞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在无菌状态下,将绞碎的胚胎转移于一50ml的无菌离心筒中,加入40ml 0.25%的无菌,用搅拌棒轻轻搅动。4)在温暖的环境中或置于37°C培养箱中轻轻摇动15分钟。5)让存留的组织块在重力作用下慢慢沉降,将含有悬浮细胞的液体转移至一无菌50ml的离心管中,该管内按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以灭活,。6)加人新鲜溶液(见前述步骤)于含有残留未消化组织块的原来的50ml离心筒中,重复步骤4和5。7)离心混合的细胞悬液,1200r/rain,5分钟,弃上清。8)用新鲜的无菌PBS重悬沉淀的细胞,按步骤7再次离心。9)用PBS反复洗涤细胞直至上清清亮为止。


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