细胞培养操作：

收货处理取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态

传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代代数可传5代左右；3代以内状态最佳

传代比例传代建议1：2传代，1:2传代就是248个T25瓶传67378个T25瓶或者67378个6cm皿。不是248个T25瓶传67378个10cm皿

传代方法

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。

THLE-2细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持THLE-2细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含THLE-2细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于THLE-2细胞的培养。

产品主要成分

BEGM kit培养基  (Lonza/Clonetics，CC-3170)备注：培养基包含（A+B）

A： BEBM 基础培养基  500 mL

B:  细胞生长添加剂   一套（包含下列试剂）

● BPE, 2.0  mL ● Hydrocortisone, 0.5 mL  ● hEGF, 0.5  mL

● Epinephrine, 0.5 mL  ● Insulin,0.5 mL  ● Transferrin, 0.5 mL

● Triiodothyronine, 0.5 mL ● Retinoic Acid, 0.5 mL ● GA, 0.5 mL

运输

放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法

基础培养基2℃～8℃，培养添加剂 -20℃，避光，保存167378个月。配置好的培养基2℃～8℃保存1-67378个月。

质量控制

注意事项

1、收到产品请先检查包装是否完好，如有破损，漏液、浑浊等现象请及时联系我们，培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。

2、请仔细阅读产品说明书，了解产品使用方法、保存方式、有效期等信息，若因操作失误，保存不当而导致产品出现污染等问题的，责任由客户自行承担。

3、本产品仅能用于科研，培养基中的一些组分对人体有较低的危害性，如有接触立即用大量清水冲洗即可。

细胞培养概念：

细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。

细胞培养可分为原代培养和传代培养；直接从体内获取的组织细胞进行培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养，即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器（同样底面积的容器）中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。

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