技术文章/ARTICLES

1.斜面保藏法将菌种转接在适宜固体斜面培养基上,待其充分生长后,用牛皮纸将棉塞部分包扎好（棉塞换成胶塞效果更好）,置4C冰箱中包藏.保藏时间依微生物的种类而定.霉菌,放线菌及芽孢菌保存2-3067个月移种一次,酵母菌间隔两个月,普通细菌一个月,假单胞菌两周传代一次.此法优点是操作简单,使用方便,缺点是保藏时间短,易被污染. 
2.液体石蜡保藏法将无菌石蜡加在已长好菌的斜面上,其用量以高出斜面顶端1CM为准,使菌种与空气隔绝.将试管直立,置低温或室温下保存.此法实用且效果较好.霉菌,放线菌,芽孢菌可保藏两年以上,酵母菌可保藏1-2年,普通细菌也可保藏1年左右. 
3.穿刺保藏法按穿刺接种方式培养菌种,菌种长好后用胶塞封严,置4℃冰箱存放. 
4.砂土管保藏法

（1）河砂处理取河砂若干加入盐酸10%,加热煮沸30min除去有机机质.倒去盐酸溶液,用自来水冲洗至中性,zui后一次用蒸镏水冲洗,烘干后用40目筛子过筛,弃去粗颗粒,备用.

（2）土壤处理取非耕作层不含腐殖质的痩黄土或红土,加自来水浸泡洗涤数次,直至中性.烘干后碾碎,用100目筛子过筛,粗颗粒部分丢掉.

（3）砂土混合处理妥当的河砂与土壤按3:1的比例掺合（或根据需要而用其他比例,甚至可全部作砂或土）均匀后,装入10x100mm的小试管或安瓿管中,每管分装1g左右,塞上棉塞,进行灭菌（通常采用间歇灭菌2--3次）,zui后烘干.

（4）无菌检查每10支砂土管随机抽1支,将砂土倒入肉汤培养基中,30℃培养40h,若发现有微生物生长,所有砂土管则需重新灭菌,再作无菌试验,直至证明无菌后方可使用.

（5）菌悬液的制备取生长健壮的新鲜斜面菌种,加入2-3ml无菌水（每18x180mm的试管斜面菌种）,用接种环轻轻将菌苔洗下,制成菌悬液.

（6）分装样品每支砂土管（注明标记后）加入0.5ml菌悬液（刚刚使砂土润湿为宜）,用接种针拌匀.

（7）干燥将装有菌悬液的砂土管放入干燥器内,干燥器底部盛有干燥剂.用真空泵抽干水分后火焰封口（也可用橡皮塞或棉塞塞住试管口）.

（8）保存置4℃冰箱或室温干燥处,每隔一定的时间进行检测.此法多用于产芽孢的细菌,产生孢子的霉菌和放线菌.在抗生素工业中应用广泛,效果较好,可保存几年时间,但对营养细胞效果不佳.