黄曲霉PCR试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素M1抗原,样本中黄曲霉毒素M1和微孔条上抗原竞争黄曲霉毒素M1抗体,同时黄曲霉毒素M1抗体与酶标二抗相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素M1成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中黄曲霉毒素M1的含量。
黄曲霉PCR试剂盒的原理:
基于竞争性酶联反应原理,相关的抗体已经包被于微孔板上。***分析时,样品加入微孔孵育,洗板后加入酶标记物,若样品残留有黄曲霉M1就会竞争包被抗体,抑制HRP酶标与包被抗体结合,加入TMB后显色反应,颜色显色强度与样品中靶毒素的含量成反比。
黄曲霉PCR试剂盒的质量要求:
1、真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE,RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
2、纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。
3、生物活性:进行相应的体外(invitro)或体内(invivo)活性检测。
4、蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
5、内毒素:kineticLAL法检测内毒素。
6、微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。