技术文章/ARTICLES

洗涤方法：

1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。

实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。

5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。

7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。

脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体

芳香基硫酸酯酶H抗体

溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体

载脂蛋白1抗体

突触融合结合蛋白6抗体

精氨酸酶1抗体

腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体

磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体

Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体

肌动蛋白样蛋白6B抗体

脊髓小脑共济失调蛋白7抗体

磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体（X11α）

载脂蛋白E抗体

甲胎蛋白AFP抗体

阴离子交换蛋白2抗体

铁调节蛋白1抗体

三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗体

载脂蛋白J抗体

载脂蛋白H抗体

二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体

AKIRIN2蛋白抗体

ADP核糖基化样因子8B抗体

三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体

AKIRIN1蛋白抗体