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    大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒操作步骤

    点击次数:589  更新时间:2022-12-22

    操作步骤:


    1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

    2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7. 温育:操作同3。

    8. 洗涤:操作同5。

    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

    SOC Medium

    2×YT肉汤 250用于基因工程菌大肠杆菌培养

    2×YT Broth

    TB培养基 250用于基因工程菌大肠杆菌培养,营养丰富

    Terrific Broth

    SB培养基 250用于基因工程菌大肠杆菌培养,营养非常丰富

    Super Broth

    HB-PE自诱导培养基 250用于基因工程菌大肠杆菌自诱导蛋白表达培养

    HB-PET Auto Express Medium

    即用型平板培养基

    平板计数琼脂平板(9cm)94个/包国际标准平板计数琼脂,含糖,用于细菌总数的测定

    Plate Count Agar

    营养琼脂平板(9cm)94个/包细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用

    Nutrient Agar

    血平皿(9cm)94个/包用于一般细菌的分离、培养和溶血试验

    Blood Agar Plates

    哥伦比亚血琼脂平板(9cm)94个/包用于营养要求高细菌的分离、培养和溶血试验

    Columbia Blood Agar

    巧克力琼脂平板(9cm)94个/包用于嗜血杆菌、奈瑟氏菌分离培养

    Chocolate Agar

    伊红美蓝琼脂平板(9cm)94个/包弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌

    Eosin-Methylene Blue Agar

    SS琼脂平板(9cm)94个/包用于沙门氏菌、志贺氏菌的选择性分离培养

    Salmonella Shigella Agar

    HE琼脂平板(9cm)94个/包用于沙门氏菌的选择性分离培养

    Hektoen Enteric Agar


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