5-羟色胺转运体蛋白试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被胎盘催乳素抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物显色,在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中试剂盒指标呈正相关。用酶标仪测定吸光度,计算样品浓度。
5-羟色胺转运体蛋白试剂盒的样本实验前准备:
液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS稀释细胞悬液,细胞浓度高。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS,或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。