维生素CELISA试剂盒在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。
加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
维生素CELISA试剂盒的工作原理:
本试剂盒采用的是竞争法酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。测定样品中维生素D水平。向预先包被了维生素D抗原的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗维生素D抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。最后,在450nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的维生素D浓度与OD值成反比,通过绘制标准曲线计算出样本中维生素D的浓度。
维生素CELISA试剂盒的质量操控方法:
1、规则操控目标的标准预期值)。
2、确定操控的目标。
3、丈量实数据。
4、对比或较对实数据与预期值之间的区别,并说明发生这一区别的因素,超出预订差错规模,报警系宣布信号,反响通道中止。
5、制定或挑选操控办法和手法。
6、采纳举动,处理区别,恢复原状(原标准状态)的手法发挥作用。