激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)是80年代发展起来的一项具有划时代意义的新产品。
实现了对内部非侵入式光学断层扫描成像,从而对被检物体样品从停留到表面单层,静态平面的观察进行到立体,断层扫描、动态全面的观察,在生命科学研究中得到迅速应用。
仪器构成
(1)计算机系统:控制着机械,光学、声学系统及各种外围设备。
(2)激光照射系统:氩离子激光器和声光调节器。
光信号接收和成像方式
(1)光信号接收 生物样品发出的荧光通常有二种接收方式:
①由光电倍增管(PMT)把光信号转变成电信号;
②利用电荷耦合器(CCD)把光信号转变成电信号。
(2)成像方式
①载物台运动成像:以直径很小的激光束照射样品,照射点发出的荧光信号经PMT变成电信号,然后载物台移动到下一点,记录该点的荧光强度。该方法无轴向像差,成像时间长;
②反射扫描成像方式,通过转动反射镜使激光连续照射样品,由CCD摄像机记录下照射点所发射的荧光,成像速度快。
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