? 冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接切片。
? 在切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程。
– 缩短了制片时间
– 抗原性不受损失
? 对稳定性差的抗原，如淋巴表面抗原尤其适合。
? 组织冻结过程中，细胞内、外的水分会形成冰晶，冻结的速度愈慢，冰晶颗粒愈大，可严重影响组织、的形态结构。因此制备冻块时要求低温、速冻。
1、冰冻组织块的常用方法
? 液氮中冰冻：组织投入液氮中 (一196?C)中10～20sec；
? 干冰中加入丙酮(或异戊烷)，液体立即气化起泡，温度降至一70?C ，将组织投入，若在干冰丙酮中置一盛有异戊烷的容器，组织投入该容器内结冻则更好；
– 上述组织在速冻时应浸埋于OCT包埋剂或甲基纤维素糊状液内，以保护组织。
– 制成冻块后若需保存，应以铝箔或塑料薄膜封包，贮存于-70 ?C冰箱。
2、切片
? 供免疫组化用的冰冻切片同样要求附贴平整，并有连续性。
? 载玻片也应清洁无油污，但一般无需涂抹粘附剂；
? 切片时，使用恒温冷冻切片机，在箱内温度-25 ?C 。切片厚度一般为4～8?m。
3、切片后处理
? 切好的冰冻切片，室温下自然晾干1～2h后，入4?C丙酮固定10min，待干燥后作免疫组化染色或封存于-20℃。
? 由于切片技术要求较高，不易得到连续性很好的切片，其形态结构亦不如石蜡片，且冻块和切片不便于长期贮存，因此的应用受限。
© 2024 上海一研生物科技有限公司版权所有 
粤ICP备42437975号 技术支持： GoogleSitemap
